链霉亲和素磁珠在化学发光免疫分析中应用

链霉亲和素磁珠在化学发光免疫分析中应用原理：

一、核心系统组成：

二、三种检测方法详解
 ① 双抗体夹心法 (Sandwich CLIA) —— 最常用 适用于检测大分子抗原（如肿瘤标志物、激素等） 
步骤流程： 
1. 固定捕获抗体 → 生物素化抗体与磁珠表面的链霉亲和素结合 
2.加入样本 → 样本中的抗原(Ag)与捕获抗体特异性结合 
3. 加酶标抗体 → 酶标记的检测抗体与抗原另一端结合，形成"三明治"夹心结构 
4. 磁分离洗涤 → 磁场吸附磁珠，去除未结合物质（关键步骤，降低背景） 
5. 加底物发光 → 加入发光底物，酶催化产生化学发光信号 - RLU ∝ [Ag]（发光强度与抗原浓度成正比）

② 竞争法 (Competitive CLIA) 适用于检测小分子抗原（如激素、药物、毒素等，分子量<1000） 原理特点： - 磁珠表面包被抗原（而非抗体） - 样本中的抗原与标记抗体竞争结合有限的抗体结合位点 - 信号强度与抗原浓度呈负相关 —— 样本中抗原越多，结合到磁珠上的标记抗体越少，发光信号越弱 
流程： 
1. 抗原包被磁珠 
2. 同时加入样本（含待检抗原）和标记抗体 
3. 竞争结合反应 
4. 磁分离检测

③ 间接法 (Indirect CLIA) 适用于检测抗体（如感染性疾病抗体检测）
 流程： 
1. 抗原包被磁珠 → 将已知抗原固定在磁珠上 
2. 加入样本（待检抗体） → 样本中的抗体与抗原结合 
3. 加酶标二抗（抗人IgG/IgM-HRP） → 标记的二抗识别并结合人源抗体 
4. 发光检测 → 检测抗体(IgG/IgM)

三、自动化检测流程
样本加样 → 孵育反应 → 磁分离 → 洗涤 → 加底物 → 发光检测
      ①                ②                    ③               ④               ⑤                ⑥

磁分离的关键作用：

- 磁场吸附磁珠，快速分离结合相与游离相
- 实现高效洗涤，去除非特异性结合，降低背景噪音
- 便于自动化操作，无需离心或过滤

四、技术性能参数

五、临床应用领域
- 肿瘤标志物：AFP/CEA/CA125/PSA等
- 激素检测：TSH/E2/Prog/Insulin等
- 传染病：HBV/HCV/HIV/TP抗体等
- 心肌标志物：cTnI/Myo/CK-MB/BNP等
- 炎症指标：PCT/IL-6/CRP/SAA等
- 药物监测：地高辛/茶碱/万古霉素等
- 过敏原：总IgE/特异性IgE等

六、方法学优势
✅ 磁珠悬浮反应 —— 均相反应，动力学优异 
✅ 大比表面积 —— 包被量大，信号增强 
✅ 快速磁分离 —— 洗涤彻底，背景低 
✅ 可自动化 —— 高通量，标准化 
✅ 灵敏度高 —— 可达10⁻¹⁸ mol/L 
✅ 线性范围宽 —— 减少样本稀释 
✅ 稳定性好 —— 磁珠可长期保存 
✅ 成本低 —— 无需包被微孔板

七、关键试剂系统