异硫氰酸荧光素FITC抗体应用

2026.08.25

抗FITC抗体,是针对FITC荧光小分子(半抗原)制备的特异性抗体,识别的是FITC染料基团本身,不识别抗体蛋白骨架;无论FITC标记在抗体、多肽、核酸上,均可被该抗体捕获结合。 可制备成未标记、HRP标记、AP标记、荧光标记(PE、AF488)、包被固相(磁珠、酶标板、NC膜)多种形式,是IVD非常经典的信号放大系统,地位类似生物素‑链霉亲和素体系。

 核心原理 

FITC既是荧光染料,又是半抗原。抗FITC抗体可以特异性捕获偶联FITC的各类探针,把FITC标记分子和酶、荧光、固相载体桥接,实现捕获或者信号放大,弥补FITC容易光淬灭、信号偏弱的短板。

 主要应用 

一、IVD体外诊断

 1. 磁微粒化学发光 抗FITC抗体包被磁珠;检测抗体标记FITC。样本抗原‑FITC检测抗体结合后,被抗FITC磁珠捕获,形成免疫复合物,实现分离检测,广泛用于细胞因子、自身抗体、神经标志物检测,显著提升灵敏度,皮克级检出能力。

2. ELISA夹心法 HRP/AP标记抗FITC,FITC标记检测一抗;抗原结合后,HRP‑抗FITC结合FITC,输出酶促显色/发光信号,实现信号放大,适合低丰度样本检测。


3. 免疫层析、胶体金 NC膜包被抗FITC,捕获FITC标记探针,用于快速试纸体系。


 4. FITC‑抗FITC信号放大系统 作为通用桥接体系,替换生物素‑链霉亲和素方案,规避样本内生物素干扰,这是IVD开发重要优势。

二、基础科研实验 

1. 流式细胞术(信号放大) 细胞经FITC一抗染色,再加荧光标记抗FITC,信号可提升3‑10倍,用于低丰度膜抗原检测;也可用于FITC标记细胞的磁分选。

2. 免疫荧光IF / 免疫组化IHC FITC一抗染色样本,再用标记抗FITC二次增强信号,改善FITC光漂白带来的信号损失;适合石蜡切片、细胞爬片定位实验。

3. 免疫印迹WB HRP标记抗FITC,检测膜上FITC标记蛋白、FITC标记核酸探针。 

4. 免疫沉淀IP 抗FITC抗体结合蛋白A/G磁珠,捕获体系内全部FITC标记蛋白,用于靶分子pull‑down实验。 

5. 探针质控鉴定 检测FITC偶联是否成功,评估标记效率,测定DOL染料‑蛋白比。

三、核酸检测配套 

FITC标记核酸探针,抗FITC‑酶结合物,用于核酸杂交、斑点杂交实验。

 和生物素‑链霉亲和素对比优势

1. 不受样本内源生物素干扰; 

2. FITC标记工艺成熟,原料成本低; 

3. 抗FITC单克隆抗体批次稳定性好。